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有關(guān)微生物與人體健康論文一

（1）了解培養(yǎng)基的配置原理和方法，掌握分離培養(yǎng)微生物的有關(guān)準備工作。

（2）掌握高壓滅菌方法及原理

（1）培養(yǎng)基的制備原理：

培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。

從營養(yǎng)角度分析：

營養(yǎng)：碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機鹽等；?適宜的酸堿度(ph值)和一定緩沖能力；?一定的氧化還原電位；?合適的滲透壓。

瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì)，是應(yīng)用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反復(fù)融化，其凝固性降低。

（2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌

在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內(nèi)溫

度也隨之增加。在0.1mpa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。

實驗材料與方法

配制培養(yǎng)基所需器材

實驗設(shè)備：高壓蒸汽滅菌器。

實驗器材：500ml三角燒瓶、藍蓋瓶、5ml刻度吸管、培養(yǎng)基、天平、砝碼、

稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。

培養(yǎng)基等集中放講臺前高壓桶內(nèi)，送到洗刷室統(tǒng)一高壓滅菌條件及注意事項

高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養(yǎng)基113℃，15min。

倒平板電爐加熱滅菌好的培養(yǎng)基打開平皿包裝倒平板（10塊）注意事項：空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）。

a.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。

b.瓶口要過火焰。

c.左手掀開平皿小口。

d.傾注滿皿底再多一點，約10ml（7cm直徑平皿）。

e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養(yǎng)過程中污染雜菌。

f.完全凝固再翻轉(zhuǎn)平板放塑料筐內(nèi)，4℃?zhèn)溆谩?/p>

（1）如何證明培養(yǎng)基滅菌是否徹底?

把滅菌后的培養(yǎng)基按滅菌鍋內(nèi)的不同位置，每處抽取數(shù)管(瓶)，標上記號，置25℃～30℃培養(yǎng)一周左右進行檢查。如果培養(yǎng)基沒有什么變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養(yǎng)基出現(xiàn)了雜菌菌落，可能是擺放的太緊，導(dǎo)致蒸汽不暢，或鍋的結(jié)構(gòu)不合理等原因所致，應(yīng)根據(jù)上述情況進行改進；如果大部分或全部菌種瓶都出現(xiàn)雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時間不夠，應(yīng)提高壓力或延長滅菌時間。經(jīng)過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。

經(jīng)過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。

（2）為什么說消毒與滅菌是微生物學和臨床醫(yī)學必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過不同途徑和媒介進入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對于切斷傳播途徑、預(yù)防和控制其感染具有重要意義。自古以來，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達到預(yù)防疾病的目的。實際上，除了在臨床醫(yī)療實踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學實驗室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過程中都需要避免微生物的污染。

接種是微生物實驗及科學研究中一項基本操作技術(shù)。根據(jù)實驗?zāi)康暮鸵螅?/p>

選擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無菌操作。

無菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進行，所有器皿均須嚴格消毒，培養(yǎng)基應(yīng)事先做無菌試驗，

接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養(yǎng)四大類微生物時應(yīng)注意選擇適宜的培養(yǎng)條件。多數(shù)細菌為專性需氧菌與兼性需氧菌，少數(shù)為厭氧菌。多數(shù)食品腐敗菌和工業(yè)用菌種，以及人和動物病原菌的最適生長溫度為37℃，并且在近中性（ph6.5～7.5）條件下生長良好。多數(shù)放線菌為好氧菌，少數(shù)為厭氧菌，最適生長溫度為28～30℃，多數(shù)適宜在偏堿性環(huán)境中生長（ph7.5～8.5）。

（1）實驗材料：實驗設(shè)備：溫箱。

實驗器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、pda平板、高鹽察氏平板、高氏合成i號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。

（2）實驗方法：平板接種：毛霉→pda平板（點植法）

啤酒酵母→pda平板（五區(qū)分離劃線法）青霉、曲霉→pda平板（連續(xù)劃線法）

1、取滅菌后小室平皿。

2、取無菌pda瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～1.0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養(yǎng)小室中的載玻片上，制作過程注意無菌。

3、用接種環(huán)取少量霉菌的`孢子接種于培養(yǎng)基四周，用無菌鑷子

將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并(轉(zhuǎn)載于:l滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標記，置28～30℃培養(yǎng)3～5d

1.取糧食樣品20g,放入無菌燒杯，加無菌水洗滌，

反復(fù)10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內(nèi)備用2.鑷子取糧食種入pda瓊脂內(nèi)，每皿可接種5-10粒。

放線菌的接種：取細黃鏈霉菌劃線法接種，在接種的劃線處，無

菌操作斜插入蓋玻片數(shù)張。

1.空氣環(huán)境無菌（應(yīng)在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)）

2.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。

3.接種環(huán)使用前，直接在酒精燈上燒灼滅菌，把環(huán)和金屬絲燒紅即可。

4.接種環(huán)使用后，先在火焰周圍把環(huán)上標本烤干，再燒灼滅菌，以免標本汽化，爆烈四濺，污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過火焰2－3次，殺滅表面微生物

1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類及產(chǎn)生毒素？

青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細黃鏈霉菌（放線菌）青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細黃鏈菌素

2、常用霉菌培養(yǎng)基有哪些？

馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基

豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）瓊脂培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基

3、霉菌的接種方法有何不同？為什么？

（1）連續(xù)劃線法（青霉、曲霉）

青霉與曲霉為局限性生長的霉菌。應(yīng)采用連續(xù)劃線接種法接種。（2）點植法（根霉、毛霉）

根霉與毛霉生長區(qū)域比較大，應(yīng)采用點植法。（3）小室載玻片培養(yǎng)法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）

實驗三霉菌的制片與形態(tài)觀察

實驗?zāi)康模簩W習并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法；

了解四類常見霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線菌的基本形態(tài)特征。

實驗原理：霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細菌和放線菌粗得多（約為3-10μm）,常是細

菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大，細胞易收縮變形，且孢子容易飛散，所以制標本時常用乳酸石炭酸棉藍染色液，用此染液做霉菌制片的特點是細胞不變形，具有殺菌、防腐作用，不易干燥，能保持較長時間，能防止孢子四處飛散，棉蘭具有一定的染色作用，染液的藍色能增大反差。

（一）菌種：在馬鈴薯瓊脂平板上培養(yǎng)3—4天的青霉(penicilliumsp.)、曲霉(aspergillussp.)、毛霉（mucorsp.）、根霉；

（二）器材及用具：鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。

（一）直接制片觀察

于潔凈載玻片上，用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲，然后小心地蓋上蓋玻

片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡（二）小室培養(yǎng)觀察

將載玻片直接放低倍鏡下觀察，再換高倍鏡觀察。

觀察原則：

毛霉：用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形

狀、大小。

根霉：菌絲、孢子同毛霉，注意觀察有無假根。

曲霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子著生位置，辨認分生孢

子梗、頂囊、小梗和分生孢子。

青霉：在高倍鏡下觀察菌絲有無隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生

孢子的形狀等。實驗結(jié)果：

分析與討論：

青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同？

青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上，菌體直立菌絲的頂端長有掃帚狀的結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)的每一個分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青綠色，進行孢子生殖。

曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中，曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀，球狀結(jié)構(gòu)的表面放射狀地生有成串的孢子，孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。

從皮膚取材查真菌如何檢查？

有關(guān)微生物與人體健康論文二

為加強醫(yī)院病原微生物實驗室生物安全管理工作，確保醫(yī)院平安目標的實現(xiàn)，我院檢驗科根據(jù)xxxx省《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關(guān)內(nèi)容，對醫(yī)院實驗室安全管理工作進行了自查，對涉及病原微生物菌（毒）種及樣本的人員進行了培訓(xùn)，提高他們生物安全的意識，掌握必要的生物安全知識。

醫(yī)院檢驗科根據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》的相關(guān)規(guī)定進行學習，并定期對有關(guān)生物安全各項規(guī)章制度的運行情況進行檢查，對存在的問題及時進行整改。實驗室所從事的實驗活動均嚴格遵守有關(guān)的國家標準和實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程，并指定專人監(jiān)督檢查實驗室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程的落實情況。同時，對檢查情況進行詳細記錄，定期召開會議討論工作中發(fā)現(xiàn)的問題，及時糾正。

因各方面條件限制我院現(xiàn)不能開展病原微生物實驗室生物的檢查，根據(jù)通知要求積極組織相關(guān)人員主要學習了：病原微生物實驗室菌（毒）種的管理嚴格登記制度，收到菌（毒）種后立即進行編號登記，詳細記錄菌（毒）種的名稱、來源、特性、用途、批號、傳代日期、數(shù)量。在菌（毒）種的管理，安全保衛(wèi)制度，安全保衛(wèi)措施，保管過程中，傳代、分發(fā)及使用，均應(yīng)及時登記，定期核對庫存數(shù)量。菌（毒）種在進行銷毀時，滅菌指示標志，滅菌效果，同時做好銷毀登記等內(nèi)容。

在此次自檢中，我院實驗室對以前制訂的處置意外事件的應(yīng)急指揮和處置體系，進一步進行了修訂，使之能滿足實際工作的需要。

針對當發(fā)生自然災(zāi)害（如地震、水災(zāi)等）或設(shè)施出現(xiàn)故障時，我們制定了可能遇到的緊急情況及其處理原則。

同時規(guī)范了菌（毒）種外溢在臺面、地面和其他表面的的處理原則、皮膚刺傷（破損）的處理原則、離心管發(fā)生破裂的處理原則并建立了意外事故報告制度。

在實驗室的顯著位置張貼了實驗負責人、實驗室工作人員、消防、醫(yī)院、公安、工程技術(shù)人員、水、電氣維修部門電話。

組織檢驗人員對《病原微生物實驗室生物安全管理條例》進行全面系統(tǒng)的學習，同時加強了實驗室的準入制度的管理，標明實驗室類型、負責人及其聯(lián)絡(luò)方式。加強了個人安全防護，并要求檢驗人員嚴格遵守標準的操作規(guī)程進行檢驗。

通過這次對微生物實驗室生物安全管理工作自查，提高了全體檢驗人員對微生物實驗室生物安全管理工作重要性的認識，加強管理，采取有效措施，確保實驗室工作安全。

有關(guān)微生物與人體健康論文三

生物技術(shù)專業(yè)是一個資料廣泛、綜合交叉各個學科而成的一項學科。新時期大學中生物技術(shù)專業(yè)對于我們的日常生活和工作中的重要意義可謂是不言而喻、有目共睹。生物技術(shù)將生物產(chǎn)品進行深入剖析和研究，從生物體不一樣層次上發(fā)揮生物產(chǎn)品的功能，極大地提高了生物產(chǎn)品的內(nèi)在價值，為人類的物質(zhì)生活提高了更加高質(zhì)量的產(chǎn)品。例如，我們生活中的保健食品、生物抗癌藥品、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品等為我們的日常生活帶來了很多幫忙和方便，提高了生活質(zhì)量。對于大學的生物技術(shù)專業(yè)來說，它涉及的范圍很廣，需要我們掌握的知識也有很多。生物技術(shù)專業(yè)不僅僅有效包括了細胞生物學、普通生物學、基因工程、生態(tài)學、分子生物學、微生物學等多種方面，這些方面與我們的生活可謂是息息相關(guān)，需要我們進行進一步的分析探討。生物技術(shù)專業(yè)的研究現(xiàn)狀具體如下。

在當今年代，生物技術(shù)專業(yè)熱潮席卷全球，它的內(nèi)在價值被廣泛認知，已成為21世紀自然科學的前沿學科。在近幾十年，世界格局發(fā)生了重大的變化，生命科學異軍突起迅速發(fā)展。在基因工程、細胞等一系列探索成為我們學校發(fā)展的主要線索和主要方向的時候，需要更多的生物技術(shù)專業(yè)人員投入到科研項目當中。生物技術(shù)所創(chuàng)造的價值已經(jīng)遠遠超過人們的想象，每一個新的發(fā)現(xiàn)和技術(shù)革新，都將帶動大規(guī)模的產(chǎn)業(yè)變革，所以，社會急需很多的優(yōu)質(zhì)高層次生物技術(shù)人才，以持續(xù)推動社會生產(chǎn)力的不斷提高和發(fā)展。同時，生物技術(shù)專業(yè)發(fā)展也面臨著許多新的挑戰(zhàn)。然而，目前生物技術(shù)專業(yè)高層次、綜合型科研人才仍然稀少，許多科研成果距離生產(chǎn)實踐還有很長的距離，這也就需要生物技術(shù)專業(yè)培養(yǎng)更多的應(yīng)用型人才?？傊锛夹g(shù)的飛速發(fā)展為生物技術(shù)專業(yè)的發(fā)展帶來了巨大的生機。所以，大學的生物專業(yè)人才具有極為廣闊的發(fā)展前景和應(yīng)用價值。

雖然，生物技術(shù)專業(yè)前景極為廣闊，給我們?nèi)粘Ｉ顜碓S多好處，然而，許多高校對生物專業(yè)的深入研究仍然不夠透徹、明晰，仍然有許多問題有待于我們?nèi)ソ鉀Q。在生物技術(shù)課程設(shè)計中仍存在不足，許多課程和教材沒有進行知識更新，無法跟上時代快速發(fā)展的步伐。課程的整體框架仍停留在20年以前的狀態(tài)，創(chuàng)新性課程少，實用性課程也少。實驗課程雖然基本滿足學生的需要，但留給學生獨立運作的機會還很少，束縛了學生的創(chuàng)新意識和思想等。同時，學生普遍的感覺是專業(yè)知識陳舊，資料缺乏與時代相對應(yīng)的新穎性和先進性。并且，生物技術(shù)所涉及的具體資料、應(yīng)用以及生活實際的一些具體方案與我們的期望值和預(yù)期值仍然有著較大的差距，需要我們進行進一步的分析、研究、討論。

既然大學生物技術(shù)專業(yè)與我們的生活息息相關(guān)，現(xiàn)根據(jù)我個人的一些觀點，對生物技術(shù)專業(yè)的發(fā)展趨勢進行簡單的解析。

1.生物技術(shù)專業(yè)的市場導(dǎo)向。生物技術(shù)專業(yè)的重要現(xiàn)實意義是不容否認的，這就決定了生物技術(shù)在現(xiàn)代社會的發(fā)展趨勢。從基礎(chǔ)科學方面，它能夠有效地幫忙人們清晰的感受到自然生命和生物的存在，加深人們的理解。在人們的日常生活中，生物技術(shù)能有效地幫忙人們治療一些疾病，方便人們的生活，例如器官移植等先進的技術(shù)的有效推廣給人們生活帶來了不可思議的驚人的好處，這就是生物技術(shù)的魅力所在。再如，人們研究的抗倒伏、抗旱等新的'品種，不僅僅有效提高了人們的生活質(zhì)量，更有效地減輕了人們的負擔。畢竟，生物技術(shù)存在并能夠得到廣泛推廣的根本原因在于它能夠為人類造福。生物技術(shù)與工程學科專業(yè)的區(qū)別在于不僅僅應(yīng)用于工廠生產(chǎn)，并且在于生物本身的潛力開放，從基礎(chǔ)的營養(yǎng)價值到功能性活性成分分析，再到食用或藥用價值開發(fā)，日新月異的新技術(shù)不斷涌現(xiàn)，為生物技術(shù)專業(yè)發(fā)展帶來了新的機遇和挑戰(zhàn)。這就需要不斷學習和認識現(xiàn)代生物技術(shù)發(fā)展的動向和潮流，加快腳步跟上甚至超越前沿，才能獲取主動，從而構(gòu)成主動性市場導(dǎo)向而不是被動順從。綜上所述，大學高校中的生物技術(shù)專業(yè)的發(fā)展方向是經(jīng)過進一步的科學研究，給人們的生活水平帶來質(zhì)的飛躍，這也是高校生物學專業(yè)設(shè)置教學目標和教學資料的重要方向。

2.生物技術(shù)專業(yè)的就業(yè)方向。隨著生物技術(shù)的逐步普及，人們的生活也越來越離不開生物技術(shù)專業(yè)方面的人才，所以，這就為生物技術(shù)專業(yè)的高校學生供給了優(yōu)越的就業(yè)機會和發(fā)展前景。隨著社會生產(chǎn)力的不斷發(fā)展提高，對生物技術(shù)行業(yè)的需求，國家從宏觀層面上更加重視高等學校生物技術(shù)的專業(yè)水平，要求不斷提高，對專業(yè)教學自然要有更高的要求，將有更多的高校開設(shè)此專業(yè)，對專業(yè)教育工作者的需求自然會增加。從事專業(yè)教學工作，不僅僅需要扎實的專業(yè)知識、技能，也要有本事應(yīng)付這個瞬息萬變的社會。同時在就業(yè)方向上，大城市與小城市、經(jīng)濟發(fā)展迅速地方和經(jīng)濟發(fā)展緩慢的地方相比，有著巨大的區(qū)別，對于生物技術(shù)專業(yè)人才來說，地區(qū)性差異造成的發(fā)展空間差異是必然的。先進性技術(shù)的發(fā)展是以經(jīng)濟實力和實際需求程度為基礎(chǔ)。據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，此刻就業(yè)的生物技術(shù)的畢業(yè)生，超過80%的人選擇到北京、上海和各大省會城市工作，認為留在大城市對本專業(yè)及個人以后的發(fā)展都能供給更多的機會。生物技術(shù)專業(yè)學生的就業(yè)目前主要在自主擇業(yè)、公務(wù)員和考取碩士研究生等三個方向，這也是學生本人的意愿。有的學生已經(jīng)厭倦了大學生活，急于進入社會工作，以期鍛煉自我，實現(xiàn)自我價值；有的學生采取穩(wěn)妥的方式，考取公務(wù)員、村官或教師等途經(jīng)，實現(xiàn)就業(yè)。但不管從哪個方向邁出就業(yè)這一步，都需要付出艱辛的勞動和努力，這也是所有生物技術(shù)專業(yè)學生所面臨的問題，由于缺乏社會經(jīng)驗，導(dǎo)致就業(yè)后跳槽頻繁，甚至灰心喪氣。所以，應(yīng)對這樣的生存挑戰(zhàn)，僅有從主觀上加深學生的專業(yè)技術(shù)技能和人際社會經(jīng)驗，從客觀上耐心尋機，才會尋求到新的發(fā)展機會。

生物技術(shù)專業(yè)具有良好的發(fā)展前景，它與信息科學等專業(yè)同樣具有發(fā)展迅猛、日新月異的特性。對于生物技術(shù)專業(yè)的大學生，機遇與挑戰(zhàn)并存，生物技術(shù)專業(yè)著重培養(yǎng)具備豐富實踐經(jīng)驗、掌握扎實的基本知識、遇事有分析問題、解決問題的本事的綜合素質(zhì)的人才，誰能夠真正掌握先進的科學知識和科研技能，誰就將領(lǐng)導(dǎo)生物技術(shù)的導(dǎo)向。正所謂，術(shù)業(yè)有專攻，人們對于生物技術(shù)專業(yè)的人才要求是十分嚴格的，這就需要學生在大學期間積累很多的知識和經(jīng)驗，經(jīng)過量的積累，從而到達質(zhì)的飛躍。在就業(yè)中的方向選擇將一向是生物技術(shù)專業(yè)人才需要研究的根本性問題，這也就需要學生在進入大學之初，就能夠規(guī)劃好自我未來發(fā)展之路，這樣才能成為最終的成功者。所以，這就需要學生具有全力以赴的精神和毅力，為生物學更好的造福人類做出自我的貢獻。

有關(guān)微生物與人體健康論文四

質(zhì)粒dna的提取、純化及檢測

姓名：xxx學號：2011001400xx年級：20xx級生物基地班 實驗日期：20xx年9月16日—30日組別：6組 同組者：xx

1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒dna的原理和方法。

2、學習并掌握凝膠電泳進行dna的分離純化的實驗原理。

3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。

4、學習并掌握凝膠中dna的分離純化方法。

1、質(zhì)粒dna的制備方法

質(zhì)粒（plasmid）是獨立存在于染色體外、能自主復(fù)制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈dna分子，分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中，但在細菌細胞中含量最多。細菌質(zhì)粒大小介于1～200kb之間，是應(yīng)用最多的質(zhì)粒類群，在細菌細胞內(nèi)它們利用宿主細胞的復(fù)制機構(gòu)合成質(zhì)粒自身的dna。

質(zhì)粒dna的制備包括3個步驟：①培養(yǎng)細菌，使質(zhì)粒dna大量擴增；②收集和裂解細菌；③分離和純化質(zhì)粒dna。主要方法包括：堿裂解法：0。2molnaoh+1%sds；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；sds裂解法：10%sds，一般用于質(zhì)粒大量提取。在實際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點以及質(zhì)粒dna的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質(zhì)粒dna。

2、質(zhì)粒dna的提取——堿變性提取法

在細菌細胞中，染色體dna和質(zhì)粒dna均被釋放出來，但是兩者變性與復(fù)性所依賴的溶ph值不同。在ph值高達12。0的堿性溶液中，染色體dna的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性；共價閉合環(huán)狀質(zhì)粒dna的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用ph值4。6的kac（naac）高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時，變性的質(zhì)粒dna可恢復(fù)原來的共價閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中；但染色體dna不能復(fù)性，而是與不穩(wěn)定的大分子rna、蛋白質(zhì)—sds復(fù)合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心，與復(fù)性的溶于溶液的質(zhì)粒dna分離。溶于上清液的質(zhì)粒dna，可用無水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于dna和rna性質(zhì)類似，乙醇沉淀

dna的同時，也伴隨著rna沉淀，可利用rnasea將rna降解。質(zhì)粒dna溶液中的rnasea以及一些可溶性蛋白，可通過酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質(zhì)粒dna。

3、凝膠電泳進行dna分離純化

電泳（electrophoresis）是帶電物質(zhì)在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定ph條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質(zhì)，它具有分子篩效應(yīng)。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會發(fā)生移動，移動的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異，就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化dna的片段，是分子生物學的核心技術(shù)之一。

凝膠電泳技術(shù)操作簡單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中dna的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，eb）或sybr gold染色直接觀察到，甚至含量少至20pg的雙鏈dna在紫外激發(fā)下也能直接檢測到。需要的話，這些分離的dna條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實驗。

分子生物學中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構(gòu)型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高，長度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的dna都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行dna序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進行電泳，并能容納較大的dna上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物，由β—d—吡喃半乳糖與3，6—脫水—l—吡喃半乳糖組成，相對分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬bp），小片段dna（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定dna的相對分子質(zhì)量，分離經(jīng)限制酶水解的dna的片段，進一步純化dna等。

瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負電荷，在電場中向正極移動。dna在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素：樣品dna分子的大小、dna分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。

1、實驗儀器

培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管（eppendorf管）、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號筆、手套等。

2、實驗試劑

lb培養(yǎng)基，抗生素ap（氨芐青霉素），溶液ⅰ，溶液ⅱ，溶液ⅲ，rnasea母液，te緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（pci）混合液，預(yù)冷無水乙醇，tae電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（eb），dna相對分子質(zhì)量標準物dna marker λ/hind ⅲ，5mol/l ph 5。2的醋酸鈉。

1、準備實驗

配制lb液體培養(yǎng)基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配lb固體培養(yǎng)基；準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個 ，將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。

2、菌體培養(yǎng)

在含有ap的lb平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒puc19的e。coli dh5單菌落，接種于20mllb液體培養(yǎng)基中進行37℃振蕩過夜培養(yǎng)，培養(yǎng)基中加ap100ul

（100ug/ml），質(zhì)粒puc19具有ap抗性基因，使得帶有puc19的質(zhì)粒得以生長。 過夜培養(yǎng)后菌體量大，雜質(zhì)較多，然后用移液槍吸取過夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mllb液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中加入ap250ul，37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對數(shù)生長期后期，生長速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質(zhì)少，適合提取質(zhì)粒。

3、質(zhì)粒提取

（1）稱量空的50ml離心管的重量為14。331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒?jié)M，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細胞。

（2）向離心管中懸滴加入5ml冰預(yù)冷的溶液ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱重得14。437g，則菌體質(zhì)量為106mg。

（3）洗滌后每100mg菌體應(yīng)加入冰預(yù)冷的溶液ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液ⅰ中的葡萄糖使

溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細胞提前破裂，防止dna受機械剪切力作用而降解。edta是ca2+和mg2+等二價金屬離子的螯合劑，可抑制dnase的活性，抑制微生物的生長。tris—cl溶液提供適當?shù)膒h。

（4） 按比例加入新配制的溶液ⅱ2ml（與溶液ⅰ對應(yīng)），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液ⅱ中的naoh使細胞膜發(fā)生了從bilayer（雙層膜）結(jié)構(gòu)向micelle（微囊）結(jié)構(gòu)的相變化導(dǎo)致細胞溶解。同時，強堿性使染色體dna、質(zhì)粒dna和蛋白質(zhì)變性；sds為下一步沉淀做鋪墊。

（5）按比例加入冰預(yù)冷的溶液ⅲ1。5ml（與溶液ⅰ、ⅱ對應(yīng)），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)sds復(fù)合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液ⅲ中的hac中和naoh，因為長時間的堿性條件會打斷基因組dna，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被pds共沉淀。同時變性的質(zhì)粒dna復(fù)性。反應(yīng)形成的高鹽環(huán)境進一步加速了沉淀。

（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側(cè)，用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3mnaac混勻，加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應(yīng)，對dna很安全，因此是理想的沉淀劑。 dna溶液是dna以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易于聚合。在ph為8左右的溶液中，dna分子是帶負電荷的，加一定濃度的naac或nacl，易于互相聚合而形成dna鈉鹽沉淀。

（7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到dna沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。

（8）以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色，隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o色。所以為了完全溶解質(zhì)粒，要在離心管上標記質(zhì)粒所在位置。

（9）將dna沉淀溶于1mlte緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個eppendorf管中。te是ph緩沖液，為dna提供穩(wěn)定的生理狀態(tài)，呈弱堿性，有利于保護堿基對。同時含有edta是二價陽離子的螯合劑，抑制dna酶作用。

4、質(zhì)粒純化

（1）eppendorf管中加入rnase a（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0。5—1h

（2）將上述的溶液平均分配到2個1。5ml的微量離心管中，每管0。5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的eppendorf管中。苯酚是經(jīng)tris飽和后的，顯黃色。苯

酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無色，在中間產(chǎn)生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質(zhì)。

（3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑，但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會影響dna的酶切，它本身易被氧化，會損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質(zhì)粒中的脂類，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現(xiàn)的泡沫，有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質(zhì)的存在。

（4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的eppendorf管中，得上清液400ul。

（5）向上清液中加入1/10體積的naac混勻，再加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。

（6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到dna沉淀，為白色。

（7）向dna沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。

（8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulte溶解于1管中。

5、質(zhì)粒檢測

（1）稱取0。4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標好液面位置，加入40ml的1×tae電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。

（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×tae 電泳緩沖液，至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。

（3）電泳1h，觀察溴酚蘭的帶（藍色）的移動。

（4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進eb溶液中進行染色，完全浸泡約5min。

（5）凝膠成像儀觀察。

（1）滴加溶液ii時，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動作要快，因為強堿在溶液中停留時間不能過長，否則會破壞質(zhì)粒dna。

（2）加入溶液iii后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液iii中和強堿使質(zhì)粒復(fù)性，不可劇烈震蕩， 防止染色體dna斷裂，應(yīng)該上下顛倒離心管，使其混勻。

有關(guān)微生物與人體健康論文五

1.基本概念、基本原理和基本觀點仍是復(fù)習重點

高考最鮮明的特點是基礎(chǔ)性?；A(chǔ)知識是高考的第一依據(jù)，高考命題所涉及的知識多是被理性抽象化了的知識在考題中借一定的情景出現(xiàn)，要求考生用生物學概念、原理、規(guī)律等做出說明，基礎(chǔ)不扎實是考生失分的第一原因。所以在學習中要做到能清楚地復(fù)述基本概念、基本原理和基本觀點;能對重點的概念、原理和觀點進行分解和綜合;能梳理教材的知識體系，揭示重點知識之間的內(nèi)在聯(lián)系;能比較、分析同類型知識的差異之處;能運用所學知識分析、解決實際問題。

從20xx年的試題可以看出，高考對基礎(chǔ)知識的考查并沒有弱化，而是要求更高了，高考不再是考查知識的再現(xiàn)，而是考查能否靈活運用所學知識分析和解決具有綜合性質(zhì)的實際問題。這就要求學生在學法上要以課本為本，充分發(fā)揮課本的主導(dǎo)作用，弄清每個章節(jié)的知識點和要求，基本規(guī)律的來龍去脈以及本章節(jié)內(nèi)容和前章節(jié)內(nèi)容的關(guān)聯(lián)。不僅要加深對基本概念、基本規(guī)律的理解與運用，而且還要弄清概念、規(guī)律的形成過程。完整地復(fù)習基礎(chǔ)知識，使用一些學習策略，如畫概念圖、框架圖等構(gòu)建生物學科的知識體系，不能留存知識盲點。

2.復(fù)習突出重點，加強考點的前后聯(lián)系

主干知識內(nèi)容不僅是學習的重點，也是高考試題中出現(xiàn)頻率較高的考點內(nèi)容。如細胞的結(jié)構(gòu)與功能、有絲分裂、減數(shù)分裂、光合作用、呼吸作用、細胞內(nèi)的物質(zhì)代謝、生命活動的調(diào)節(jié)、遺傳的基本定律、伴性遺傳、基因突變、染色體變異、生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能、環(huán)境保護、基因工程、免疫、細胞工程等等。對這些主干知識內(nèi)容的理解要有一定的深度和廣度，才能以此去分析和解決新情景的問題。要力求做到知識點、能力點、薄弱點、應(yīng)用點和考查點心中有數(shù)，那種不分主次泛泛復(fù)習以及題海泛濫，無疑都是有害的。概括起來高中生物的主干知識有以下方面的內(nèi)容：

在生命的物質(zhì)基礎(chǔ)和生物體的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)方面，重點考查蛋白質(zhì)和核酸、細胞增殖過程中的染色體的變化規(guī)律等;特異性免疫和免疫失調(diào)引起的疾病等內(nèi)容;

在生物的新陳代謝方面，重點考查酶、光合作用和呼吸作用、三大類物質(zhì)的代謝及微生物的代謝特點等內(nèi)容;

在生命活動的調(diào)節(jié)和免疫方面，重點考查激素調(diào)節(jié)及與生活相關(guān)的免疫知識;

在遺傳和進化方面，重點考查從基因水平上分析遺傳學問題以及遺傳育種和遺傳系譜;

在生物與環(huán)境方面，重點考查應(yīng)用生態(tài)學觀點方法分析問題和解決問題的能力。

3.重視實驗?zāi)芰Φ奶岣?/p>

生物都是以實驗為基礎(chǔ)的自然科學，它的許多知識來源于對實驗結(jié)果的分析、歸納和總結(jié)。對實驗?zāi)芰Φ目疾槭钱斍案呖嫉闹匾獌?nèi)容之一。對于每一個實驗，必須認真弄懂實驗?zāi)康?、原理，熟悉實驗器材，掌握實驗方法和步驟，既要重視實驗結(jié)果，更應(yīng)該重視對結(jié)果的分析，學會探究和推論;能正確處理數(shù)據(jù)，對結(jié)果整理與計算，得出正確結(jié)論，能處理非預(yù)期現(xiàn)象。

同時還要熟悉實驗設(shè)計的基本方法和技巧，從而培養(yǎng)自己的實驗?zāi)芰蛣?chuàng)新精神，適應(yīng)高考試題的變化。因此要注重挖掘教材潛在的實驗與探究因素，自然科學的知識是在觀察、實驗的基礎(chǔ)上得出或通過實驗得到實證的，復(fù)習時要多從實驗角度想一想，這一結(jié)論是怎么得出的?我們有沒有辦法進行驗證與探究?加強實驗的基本思想、方法以及實驗題的解題技能、技巧的形成訓(xùn)練。要掌握實驗與探究的基本方法以及解答實驗類試題的基本技能。

4.復(fù)習的廣度比深度更重要

從近幾年的高考可以看出，今后的命題可能會無所謂傳統(tǒng)的重點、熱點、冷點之分，因此要善于構(gòu)建知識的體系與網(wǎng)絡(luò)，彼此融會貫通，并注意查漏補缺，由“深挖洞”教學向“廣積糧”教學轉(zhuǎn)軌，知識的廣度應(yīng)該得到充分展現(xiàn)，要培養(yǎng)學生能讀懂自然科學方面資料的能力，能看懂圖表所包含的信息，并能從中找出規(guī)律，具備基本的自然科學知識以及判斷、推理和計算能力。閱讀生物學方面的資料時，要能讀懂模式圖、示意圖和圖解。

5.知識的綜合應(yīng)用是關(guān)鍵

學習生物基礎(chǔ)知識僅僅停留在理解上是不夠的，還要能在理解的基礎(chǔ)上，應(yīng)用這些知識指導(dǎo)自然科學的研究、社會的生產(chǎn)和人類的生活。要求準確把握、理解生物學知識，形成知識的遷移能力，解決生產(chǎn)、生活中實際問題，重點在于：

①用自然科學的基本知識解釋和說明人類生活和社會發(fā)展中遇到的問題;

②了解自然科學知識在人類生活和社會發(fā)展中的應(yīng)用;③能夠運用自然科學的知識對有關(guān)見解、實驗方案、過程和結(jié)果進行評價。

6.突出圖文信息轉(zhuǎn)換與分析能力的培養(yǎng)

高考中以圖像、圖表和數(shù)據(jù)的信息出題是最為重要的考查手段。能夠閱讀這類資料并初步運用這種資料形式，把握事物的特征、規(guī)則或關(guān)系，體現(xiàn)了收集和處理信息的能力、獲得新知識的能力、分析和解決實際問題的能力。生物體內(nèi)的生理過程，往往隨著時間、外界條件的變化而發(fā)生有規(guī)律的變化。

這些規(guī)律往往通過曲線的形式表達出來，以曲線、圖表為載體，可考查學生將圖表轉(zhuǎn)換成文字表達，或把文字轉(zhuǎn)換成圖表表達，甚至圖表間的轉(zhuǎn)換能力。這類試題能夠考查學生的識圖能力、判斷能力和分析表達等多種能力，而且有較好的區(qū)分度，因此將會是新教材背景下高考命題的熱點和重點。因此復(fù)習中應(yīng)注意從情境中獲得信息。平時要加強識讀圖表能力的訓(xùn)練，善于從圖、表提供數(shù)據(jù)的處理過程中獲取信息，理解題意，作出正確判斷。

7.科學作答不可忽視

規(guī)范化答題時考場上減少失分，獲取高分的重要法寶。首先，在保證答題方向正確時，一定要認真審題，逐字逐句看清楚，提取一切有效信息，挖掘一切隱含條件，排除干擾信息和迷惑條件，從容答題。答案要準確，要做到條理清楚、邏輯嚴謹;簡潔明了，答案要盡量使用規(guī)范化的學科語言。平時要做到錯題分析訂正要到位，復(fù)習中要有一個錯題本，監(jiān)督自己把握重點，消除盲點，加強弱點，切實做好糾錯。生物試題很多，無論如何也做不完。

因此要歸類做有代表性的試題，一般情況下第一次做對的題，以后不會做錯，第一次做錯的題，以后做錯的可能性較大，因此要有一個錯題本，對作業(yè)、考試中出現(xiàn)的差錯，及時反思，及時糾正;對事故易發(fā)地帶有意識地加以強化訓(xùn)練。每一次練習或考試后，要對差錯做出詳盡的分析，找出錯誤原因。這同時為考前的復(fù)習積累了重要的有針對性的資料。

細節(jié)決定成敗。高考解題不規(guī)范是造成考生非智力因素失分的一個主要原因。尤其是實行網(wǎng)上閱卷后，對規(guī)范解題提出了更高的要求。比如對字體潦草的卷面直接評卷和掃描到計算機中再評卷，可視效果就不一樣，后者會更差。所以解題要做到“四化”，即段落化、序號化、要點化、提示化。答案要力求具有準確性、科學性、完整性、簡潔性。最后，結(jié)果一定要寫在醒目的位置。

8.心態(tài)很重要

高考二輪復(fù)習時決定高考的關(guān)鍵，不僅是因為它是知識方法綜合的關(guān)鍵，也是學生心理的關(guān)鍵期。臨近高考，考生最容易出現(xiàn)急躁情緒。許多考生的放棄都是從第二輪復(fù)習開始的，原因主要是各科進行二輪復(fù)習的內(nèi)容跨度大，綜合性高，部分學生有些吃力，另外隨著高考的臨近，學生的心理壓力比較大，所以在第二輪復(fù)習中，不僅要重視知識方法能力的培養(yǎng)，更要重視良好的心理素質(zhì)的培養(yǎng)。

“學會”永無止境，“會學”更為關(guān)鍵。我們在二輪復(fù)習的過程中，應(yīng)針對自身的實際情況，找準“分數(shù)增長點”，消化掌握已有的知識，把漏洞補齊，把薄弱的環(huán)節(jié)夯實，把該記的東西記牢，相信成績會有很大的提高。

心存高遠，保持一種平靜而有激情的心態(tài)，加上矢志不渝的努力，成功就會向你綻開燦爛的笑容。

【高考生物復(fù)習計劃二】